HMGB1-TLR4和Müller细胞在视网膜血管生成中的作用

摘要

目的探讨高迁移率族蛋白1-Toll样受体4(HMGB1-TLR4)信号通路及Müller细胞在视网膜新生血管中的作用。方法将小鼠分为3组,分别是常氧组、正常视网膜缺血模型组(OIR组)和TLR4基因敲除OIR(TLR4^(-/-)OIR)组。通过视网膜FITC-Dextran荧光灌注铺片染色和GS-isolectin B4染色评估新生血管情况。通过免疫荧光染色,观察HMGB1在小鼠视网膜中的表达情况,观察HMGB1和TLR4、TLR4和GFAP的共表达情况。通过PCR检测两组OIR小鼠出生后12天(P12)和出生后17天(P17)时视网膜组织HMGB1 mRNA表达水平。结果通过两种视网膜血管平铺片染色方法观察到P17正常OIR小鼠新生血管面积最大,TLR4^(-/-)OIR小鼠的新生血管面积相对较少,这提示TLR4基因缺失可以抑制血管的生成。通过免疫荧光染色结果发现在TLR4^(-/-)OIR小鼠中,HMGB1、TLR4和GFAP的表达均较OIR组减少。PCR检查结果发现P12和P17时,TLR4^(-/-)OIR小鼠中的HMGB1的表达水平均较正常OIR组低。结论HMGB1-TLR4可以通过活化Müller细胞促进视网膜新生血管的生成,因此靶向抑制HMGB1-TLR4信号通路,可以降低Müller细胞的活性,抑制视网膜新生血管的生成。