静脉移植脐带MSCs治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

摘要

目的探讨人脐带MSCs(human umbilical cord MSCs,HUC-MSCs)静脉移植治疗脊髓损伤的可行性。方法取60只8周龄Wistar大鼠,采用改良Allen’s法制备大鼠脊髓损伤的模型,随机分为3组,每组20只。A组于造模后1周经大鼠尾静脉注射标记好的HUC-MSCs 200μl,同理,B组注射相同剂量DMEM,C组未作特殊处理。术后1 d及1周、2周、3周、4周、6周、8周、10周、12周行BBB评分观察大鼠后肢功能恢复情况。3周、8周和12周取材行HE染色观察损伤周围细胞及空洞形成情况;免疫组化观察HUC-MSCs通过静脉向损伤脊髓局部迁移、存活和分化情况,通过胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)比较各组损伤局部星形胶质细胞增生情况。结果损伤后大鼠均呈现双后肢全瘫,术后1 d BBB评分0~1分,随后各组BBB评分逐渐上升;从术后3周起,A组BBB评分均高于B、C组(P<0.05)。HE染色示术后3周、8周、12周,A、B、C组标本可见损伤局部结构紊乱,胶质瘢痕大量增生,神经纤维排列紊乱,神经元包体萎缩,周围形成空洞及组织液化。术后12周标本放大相同倍数下,可见细胞移植组空洞较其他两组减小。术后3周时,荧光显微镜观察可见A组Brd U标记的HUC-MSCs存活并向损伤区聚集。术后3周、8周、12周,B、C组均未见Brd U标记的HUC-MSCs。A组各时间点均未观察到NSE、GFAP染色阳性细胞,即未见到HUC-MSCs向神经细胞、神经胶质细胞方向分化。第3周时A组可见损伤区周围星形胶质细胞大量增生;8周时星形胶质细胞数量减少;12周时可见脊髓损伤局部星形胶质细胞减少,并且形成胶质瘢痕,A组形成的胶质瘫痕面积较B组、C组减少。结论静脉移植HUC-MSCs可向大鼠脊髓损伤部位迁移并修复受损神经,为治疗脊髓损伤提供一种无创性移植技术。