含合成启动子的重组杆状病毒研究

摘要

以含大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因,及人工合成启动子的三种转移载体质粒:pSVI^+G,pSVI^-G和pSWVI^-G,重组了三株带人工合成启动子、驱动β-半乳糖苷酶基因的粉纹夜蛾核型多角体病毒TnNPV-SVI^-G,TnNPV-SVI^+G及TnNPV-SWVI^-G。其中TnNPV-SVI^+G形成多角体,TnNPV-SWVI^-G保留了多角体启动子。它们为遗传上稳定、均一的病毒,接种感染草地夜蛾细胞后,25小时可测到β-半乳糖苷酶的活性,50小时达最高,80小时后开始下降。实验表明:保留野生型多角体启动子,对合成启动子表达外源基因有增强作用,但保留启动子与保留多角体基因,则有抑制人工合成启动子表达外源基因的作用。