荜茇酰胺通过诱导口腔鳞癌细胞自噬抑制增殖

摘要

【目的】探讨荜茇酰胺(PPLGM)对口腔癌存活的影响及机制。【方法】体外培养口腔鳞状细胞癌Cal27及UM1细胞株,经不同浓度的荜茇酰胺处理后,MTT比色法检测荜茇酰胺对增殖的影响,蛋白质印迹法检测胞内微管相关蛋白轻链3-I、3-Ⅱ(LC3-I、LC3-Ⅱ)、Beclin1、p62、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及ribosomal S6(S6)的表达或活性变化;用自噬抑制剂3-Methyladenine(3-MA)或者Bafilomycin A1(BAFA1)和荜茇酰胺共处理细胞后,检测LC3-Ⅱ、p62表达和细胞活力。【结果】与对照组比较,荜茇酰胺显著抑制Cal27及UM1细胞株增殖能力,呈浓度及时间依赖性(P<0.05);Western blot结果显示,不同浓度(1.0、3.0和5.0μmol/L)荜茇酰胺处理细胞均使LC-I、LC3-Ⅱ表达水平显著高于对照组(P<0.05),而Beclin1和p62表达低于对照组(P<0.05);荜茇酰胺处理组中p-mTOR和p-S6磷酸化水平显著低于对照组(P<0.05);与单独荜茇酰胺处理比较,3-MA和荜茇酰胺共处理使胞内LC3-I和LC3-Ⅱ表达水平明显下降,p62表达升高(P<0.05),但BAFA1和荜茇酰胺共处理使细胞内p62表达升高(P<0.05),LC3-Ⅱ表达水平无明显改变;3-MA和B AFA1处理都能拮抗荜茇酰胺对细胞活力的抑制效应。【结论】荜茇酰胺通过抑制mTOR/S6通路活性诱导口腔鳞癌细胞发生自噬,进而抑制增殖。