四种细胞因子组合从小鼠骨髓细胞体外诱导优势不成熟CD8a+DC

摘要

[目的]探索从小鼠骨髓细胞体外诱导大量优势不成熟 CD8a+DC(DC2)的新方法.[方法]取小鼠骨髓细胞,采用GM-CSF 5 ng/mL,IL-4 20 ng/mL,Flt3L 25 ng/mL,SCF 100 ng/mL 4种细胞因子组合,37℃,5%CO2体外培养诱导.第3、7、16天流式细胞术4色荧光标记法分析细胞表型,细胞计数分析总细胞产量,采用电镜、免疫荧光及相差摄影观察细胞形态.[结果]小鼠骨髓细胞经GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF诱导第3天在CD11c+的DC细胞群中可产生97.09%的CD8a+优势DC2细胞(占总细胞的34.6%),其中CD8a+MHCⅡ-的不成熟DC占61.77%;随培养时间延长比例下降,但培养第16天时CD8a+的不成熟DC仍占优势.总细胞计数分析显示随培养时间延长,细胞总数下降.电镜、免疫荧光及相差摄影等形态学检查显示所诱导的DC呈现典型树突状形态特征.[结论]GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF可以体外快速诱导小鼠骨髓细胞产生大量优势不成熟CD8a+DC.是体外制备不成熟DC2的一种较好的新方法.