乌头基因组DNA提取与RAPD反应体系优化

摘要

采用改进方法提取乌头基因组DNA,建立乌头RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出乌头RAPD的最佳方案为:25μl反应体系中包括dNTPs 0.06 mmol·L-1,引物0.2μmol·μL-1,模板DNA40 ng,Taq酶1U,Mg2+4 mmol·L-1,10×buffer缓冲液2.5μl,其余部分为无菌超纯水.PCR扩增循环为95℃3 min,38℃1 min,72℃2min 1次循环;94℃1 min,38℃1min,72℃2 min,45次循环,最后72℃延伸10 min.