米心水青冈基因组DNA提取及RAPD反应体系优化

摘要

采用4种方法对米心水青冈基因组DNA进行提取,通过比较得出改良CTAB法提出的DNA纯度较高,能够达到扩增要求,因此采用此方法用于正式DNA的提取。适合米心水青冈的RAPD反应体系为:反应体积为25μL,模板DNA40ng,引物0.8μmol.L-1,Taq聚合酶1.25U,Mg2+浓度2.0mmol.L-1,dNTP浓度0.16mmol.L-1。适合米心水青冈RAPD扩增程序:94℃预变性3min,一个循环,94℃变性30s,37℃退火1min,72℃延伸2min,45个循环。