整联蛋白依赖的Akt激活在内皮细胞铺展中的作用

摘要

目的探讨内皮细胞铺展的潜在分子机制。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)接种到纤维连接蛋白(fibronectin,FN)包被的孔板中,培养相应的时间后,检测HUVECs的铺展面积和Akt的磷酸化;在有些实验中,采用磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)-Akt通路抑制剂和整联蛋白抑制剂预处理细胞后,再检测细胞的铺展面积以及PI3K-Akt的激活。结果当HUVECs接种到FN上,细胞铺展面积逐渐增加,在120 min到达平台期;内皮细胞接种15 min后,Akt磷酸化水平就显著增强,并于60 min到达峰值;PI3K-Akt通路抑制剂LY294002和渥曼青霉素都显著抑制FN介导的内皮细胞铺展;整联蛋白抑制剂RGDS短肽显著抑制FN介导的Akt激活以及内皮细胞铺展。结论整合蛋白依赖的Akt激活可能对FN诱导的内皮细胞铺展至关重要。