水曲柳松散型愈伤组织诱导及悬浮培养体系的优化

摘要

以水曲柳组培苗的叶片和叶柄为研究材料诱导愈伤组织,通过生长量、接种量、pH值,培养基中碳、氮、磷等因素优化悬浮细胞培养体系.结果表明:以WPM为基本培养基,添加6 mg/L TDZ+5 mg/L 6-BA时,对水曲柳叶柄的愈伤组织诱导率最高,达到90.91％;在只添加6 mg/L TDZ时,叶片的愈伤组织诱导率最高为87.5％.在WPM+0.3 mg/L TDZ+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA的培养基中,可以诱导出松散型的愈伤组织,悬浮培养时细胞的生长周期为18d.在3％的蔗糖浓度下,细胞增长量最高,一个生长周期内鲜质量增加了400％.氮磷浓度超过正常水平不利于细胞的生长.最终获得了能够长期继代培养水曲柳单细胞和小细胞团的悬浮培养体系.