猫胰岛细胞的分离纯化和培养

摘要

目的建立猫胰岛细胞分离纯化和体外培养的方法。方法在自制玻棒持续振荡下常规分离胰岛细胞，进行单层细胞培养和组织块培养。采用差速贴壁法、碘乙酸法、消化时间差法去除培养中的成纤维细胞。动态收集单层细胞培养液，分别用放射免疫法和比色法检测胰岛素和淀粉酶含量。光镜下观察5～30d细胞生长情况。分别对培养第5、15、21天的细胞进行葡萄糖负荷试验、组织块培养的细胞进行透射电镜检查。结果猫胰岛细胞在体外培养可保持良好的生物学活性3周或3周以上(组织培养)。结论在国内首次建立的猫体外胰岛细胞培养方法可行可靠，体外培养第7～25 d的细胞形态和功能良好，是进行实验研究的极好材料。