湖南多花黄精根腐病病原菌的分离与鉴定

摘要

[目的]明确多花黄精根腐病在湖南地区的发生规律及其病原菌种类,为湖南多花黄精根腐病的综合防治及GAP(中药材生产质量管理规范)种植提供科学依据.[方法]以湖南地区具有典型根腐病症状的多花黄精植株为材料,采用传统的平板分离法对其病原菌进行分离纯化,通过rDNA-ITS序列分析及形态学观测鉴定病原菌的种类和分类地位,并依据Koch?s法则验证病原菌的致病性.[结果]湖南地区的多花黄精根腐病以生长旺盛期(5—7月)发生最严重,平均发病率为12％,严重时可达20％;发病部位主要是多花黄精根部.从患典型根腐病多花黄精根茎的病健交界处分离获得4株分离菌株(G1～G4),菌株G1、G2和G4经PCR扩增分别获得511、573和573 bp的目的条带,菌株G3因PCR扩增条带混杂,导致测序失败.菌株G1与F.foetens(GenBank登录号NR_159865.1)的rDNA-ITS序列相似性为99.22％,菌株G2和G4与F.hostae(GenBank登录号NR_171109.1)的rDNA-ITS序列相似性为99.81％.菌株G1在PDA培养基上生长较快,培养7 d后其菌落直径为6.7 cm,气生菌丝致密,呈毡状,白色至粉紫色;菌株G2和G4在PDA培养基上培养7 d后其菌落直径为6.2 cm,气生菌丝呈放射状,白色至淡黄色.将菌株G1、G2和G4分别接种至健康多花黄精植株的根茎上,接种10 d后均表现出强致病性,呈典型的根腐病发病症状.其中,菌株G1接种10 d后多花黄精根茎开始变褐腐烂,且伴有明显的腥味;菌株G2和G4接种10 d后多花黄精根茎初期变褐色,后期病斑腐烂部分的根茎出现凹陷.[结论]不同地理位置、栽培方式及黄精品种,均有可能导致黄精根腐病的发生情况及其病原菌存在差异,在一定程度上增加了黄精根腐病防治工作的难度,且给后期的产品加工带来安全隐患.F.foetens和F.hostae是引起湖南多花黄精根腐病的致病菌.