受体胚龄对鸡原始生殖细胞移植后归巢的影响

摘要

【目的】探究受体胚龄对鸡原始生殖细胞（Primordial germ cell,PGC）移植后归巢的影响,确定最佳回注时间窗口,为提高转基因鸡的生产效率提供参考依据。【方法】从广西黄羽鸡胚分离获得PGC,体外培养并进行转基因操作后,移植回注到不同胚龄的受体鸡胚中,移植5 d后分离性腺拍照观察,对比受体鸡胚孵育至14HH～17HH时对PGC迁移归巢到性腺的影响。【结果】分别在14HH～17HH胚龄时移植回注PGC,移植5 d后的鸡胚死亡率为30.0%～60.9%,但不同移植胚龄间的差异不显著（P〉0.05）。根据鸡胚性腺中的GFP阳性细胞数可划分为6个等级（I～VI）,且随着移植胚龄的增加,PGC迁移效率呈下降趋势。14HH胚龄移植的鸡胚性腺GFP阳性细胞集中在V级（40.0%）,15HH胚龄移植的集中在III级（42.1%）,16HH和17HH胚龄移植的则集中在II级（45.4%和54.5%）,GFP阳性细胞含量最高等级（VI级）仅出现在14HH胚龄移植的鸡胚性腺中。【结论】随着受体胚龄的增加,PGC迁移效率呈下降趋势,但鉴于实际操作的难易程度,确定PGC移植回注的最佳时间窗口为14HH鸡胚（孵育50 h）。