StAR基因探针的制备及应激状态下小鼠睾丸间质细胞StAR基因的表达分析

摘要

目的制备类固醇快速调节蛋白基因(StAR)探针,观察应激状态下StAR基因在小鼠睾丸间质细胞的表达变化。方法提取C57BL/6小鼠睾丸总RNA,并以此为模板,通过逆转录PCR获得StAR基因片断,运用T/A克隆策略,将扩增的StAR基因片断重组于pCR2.1-POPO载体,经过双酶切和DNA序列鉴定后,体外转录制备地高辛标记的StARcRNA探针。采用限制活动制备应激状态小鼠模型(实验组),运用原位杂交的方法分析实验组和正常对照组睾丸间质细胞的StARmRNA表达水平。结果成功制备StAR基因探针,实验组睾丸间质细胞的StARmRNA的水平较对照组明显下降(P<0.05)。结论应激状态可下调睾丸间质细胞中StAR基因的表达,从而最终使雄激素水平降低。