新生大鼠缺氧缺血脑损伤时脑组织GLUT1表达及神经元凋亡研究

摘要

目的研究新生大鼠缺氧缺血(HI)时脑组织葡萄糖转运体1(GLUT1)表达及其与神经元凋亡的关系。方法实验分为正常对照组、假手术组和HI组,采用Rice方法建立10日龄SD大鼠缺氧缺血脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)模型。分别于HI后2、8、24、48和72h处死取脑。HE染色观察脑组织病理改变,RT-PCR法检测GLUT1mRNA表达,免疫组织化学法检测GLUT1及活性天冬氨酸酶-3(cleaved caspase-3,CC3)的表达,TUNEL法检测凋亡细胞。结果HE染色显示随HI时间延长,细胞损伤程度加重,48h细胞缺失明显,对照组细胞排列有序,形态正常。RT-PCR及免疫组织化学检测结果显示脑组织GLUT1的mRNA及蛋白于HI后表达增加,即2h开始升高,24h达高峰,与对照组(正常对照组和假手术组)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。CC3蛋白于HI后2h开始表达,48h达到高峰,高于对照组(P<0.01)。TUNEL染色显示HI后随时间延长,阳性细胞数逐渐增多,48h达到高峰,高于对照组(P<0.01)。结论新生大鼠HI后,脑组织GLUT1 mRNA及蛋白表达增高,其高峰早于CC3及凋亡高峰,提示GLUT1上调可能对神经元凋亡具有一定的抑制作用。