人源JAZF1基因真核表达载体的构建及其对胚胎癌细胞凋亡的影响

摘要

[目的]构建人源转录因子锌指并列基因1(JA ZF1)真核表达载体,并探究过表达JA ZF1对胚胎癌细胞存活的影响.[方法]以胚胎癌细胞NCCIT的cDNA为模板扩增JA ZF1基因片段,并将其与pRK5-myc载体连接,构建重组质粒,转染至NCCIT细胞;通过实时荧光定量PCR和DAPI染色法分别检测过表达JA ZF1对NCCIT细胞中炎性因子IL1-β、IL8、TGF-β转录水平的影响及对NCCIT细胞存活的影响.[结果]过表达JAZF1基因后,促炎因子IL1-β(P<0.05)、IL8(P<0.01)转录水平明显下降,而抑炎因子TGF-β的mRNA表达水平无明显变化(P>0.05),同时NCCIT细胞出现更明显的细胞凋亡(P<0.01).[结论]JA ZF1可能通过抑制促炎因子IL1-β和IL8的表达来抑制炎症发展,进而抑制畸胎瘤进展.