绿豆防御素基因的克隆、序列分析和植物表达载体的构建

摘要

从绿豆叶片提取总DNA中,通过PCR方法扩增出362bp的具有多种抗病、抗虫特性的绿豆防御素基因,并将其克隆到pGM-T easy vector,酶切图谱及DNA测序分析表明克隆的片段包含了完整的绿豆防御素基因的编码序列,与原序列同源性达到99.5%,蛋白质同源性达到100%。此基因编码的多肽由73个氨基酸组成,含有28个氨基酸的信号肽和8个半胱氨酸,可形成4个二硫键。我们用此基因构建了高效植物表达载体pBin438-LD。