分光光度法测定双组分蛋白含量的波长选择

摘要

分光光度法测定多组分蛋白含量,快速简便,极具应用价值,但其测定波长的选择缺乏研究与指导。本研究以牛血清白蛋白和牛血红蛋白的混合样品为研究对象,对双波长分光光度法测定波长的选择进行了分析。结果显示:BSA与Hb的相互干扰程度受测定波长的影响显著;采用两组份最大吸收波长为测定波长,或以BSA等吸收波长作为测定波长,又或单纯选择单组份标准样品相关系数较高的波长为测定波长,均不能获得令人满意的测定结果。以RSDBSA+RSDHb最小为判断依据,获得的最佳测试波长(235nm,410 nm)可以兼顾BSA与Hb的测定,在此条件下BSA的回收率为(101.25±1.03)%,Hb的回收率为(99.26±1.39)%。上述研究结果可用于BSA-Hb双组分蛋白样品的快速检测,并对多波长分光光度法测定波长的选择具有参考价值。