对污水处理厂中大肠杆菌的四环素耐药性分析

摘要

抗生素的滥用导致了耐药菌的大量出现,对环境安全和人体健康造成潜在威胁.为研究污水处理厂进出水中的大肠杆菌对典型抗生素——四环素的耐药性和耐药基因的分布状况,以中国深圳市N污水处理厂和F污水处理厂的进水(NJ和FJ)和二沉池出水(NC和FC)为研究对象,从水样中分别分离培养得到86、88、46和52株大肠杆菌,比较菌株在有无添加10 mg/L四环素盐酸盐溶液的培养基中12 h的生长曲线,得到不同菌株对四环素的表观耐药性.结果表明,从污水处理厂进水样品NJ和FJ分离到的大肠杆菌对四环素耐药性检出率分别为36%和23%,出水样品NC和FC中的检出率分别为4%和8%,说明污水处理工艺对降低四环素耐药菌丰度有显著效果.采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和宏基因组学测序方法对部分敏感菌和耐药菌的四环素耐药基因进行检测,结果显示,四环素耐药菌中普遍携带tet(A)、tet(B)、tet(C)、tet(D)、tet(L)和tet(M)等四环素耐药基因,卡方检验(χ2检验)结果表明,四环素耐药基因与其耐药性密切相关.然而,在四环素敏感菌中也检测到四环素耐药基因tet(A),表明抗生素耐药性的表观型和基因型也可能存在不一致现象.该研究为进一步探究耐药菌的耐药机制和挖掘新型的耐药基因提供了实验基础.