PRMT1对喉癌细胞增殖、迁移的影响及其机制

摘要

目的探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)调控核糖核苷酸还原酶亚单位M2(RRM2)对喉癌细胞Hep-2增殖、迁移的影响及其机制。方法收集蚌埠医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科收治的确诊为喉癌的8例患者的病理标本及癌旁正常组织。使用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测喉癌和癌旁组织中PRMT1 mRNA、RRM2 mRNA相对表达量。Western blot实验检测喉癌和癌旁组织中PRMT1、RRM2蛋白相对表达量。通过对Hep-2细胞不同处理分为3组:si-PRMT1组(PRMT1小干涉RNA下调PRMT1)、si-NC组(无关序列转染)和control组(不进行处理)。噻唑兰(MTT)法检测各组细胞增殖。RT-PCR检测各组Hep-2细胞中PRMT1、RRM2 mRNA、vimentin mRNA和E-cadherin mRNA相对表达量。Transwell检测各组Hep-2细胞侵袭和迁移能力。Western blot检测各组Hep-2细胞PRMT1、RRM2蛋白、侵袭和迁移相关蛋白(vimentin、E-cadherin)相对表达量。结果喉癌组织中的PRMT1和RRM2 mRNA和蛋白较癌旁组织均显著增加(P<0.05)。MTT结果显示,与control组和si-NC组比较,si-PRMT1组细胞存活率明显下降(P<0.05)。RT-PCR结果显示,与control组和si-NC组比较,si-PRMT1组PRMT1 mRNA、RRM2 mRNA、vimentin mRNA和E-cadherin mRNA相对表达量明显下降(P<0.05)。Transwell结果显示,与control组和si-NC组比较,si-PRMT1组细胞侵袭率、迁移率明显降低(P<0.05);Western blot结果显示,与control组和si-NC组比较,si-PRMT1组PRMT1、RRM2、vimentin和E-cadherin蛋白相对表达量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论PRMT1可增强喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与调控RRM2相对表达量有关。