DIS3通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进人骨髓瘤细胞凋亡

摘要

目的 探究DIS3对人骨髓瘤细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 选取人骨髓瘤细胞株NCI-H929、RPMI 8226和U266为研究对象,分别设计并构建DIS3基因过表达载体和DIS3-siRNA,3种细胞均随机分成5组:对照组、DIS3-siRNA阴性对照(negative control,NC)组、DIS3空载组、DIS3过表达组以及DIS3-siRNA组.细胞培养48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡水平.qRT-PCR及Western blot检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2及Caspase-3在mRNA和蛋白水平上的表达,同时检测PI3K、AKT及mTOR的表达情况.结果 NCI-H929、RPMI 8226和U266细胞转染后,与DIS3空载组比较,DIS3过表达组细胞凋亡率均显著上升(P<0.01),Bax、Caspase-3、PI3K、AKT和mTOR的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2的表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01).与DIS3-siRNA NC组比较,DIS3-siRNA组NCI-H929、RPMI 8226和U266细胞凋亡率均显著下降(P<0.05或P<0.01),Bax、Caspase-3、PI3K、AKT和mTOR的表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),Bcl-2的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01).结论 DIS3过表达能显著促进人骨髓瘤细胞凋亡的发生,促进Bax和Caspase-3表达而抑制Bcl-2的表达,这可能与对PI3K/AKT/mTOR信号通路的调控密切相关.