萝卜硫素调控自噬相关蛋白抑制非小细胞肺癌线粒体自噬

摘要

cqvip:目的 探索萝卜硫素(D,L-sulforaphane,SFN)抑制人非小细胞肺癌(NSCLC)线粒体自噬的机制,发现其可能诱导凋亡的关联。方法 用SFN(20μmol/L)处理或未处理(对照)人非小细胞肺癌SK-1细胞后,通过液相质谱与色谱联用技术分析蛋白的差异表达;用透射电镜观察细胞形态变化;用Western blot检测细胞质和线粒体蛋白中自噬标志蛋白(microtubule associated protein 1 light chain 3Ⅱ,LC3Ⅱ)表达变化;利用UNLCAN数据库分析肺癌与癌旁组织中蛋白的差异表达;利用Kaplan-Meier Plotterat数据库分析线粒体自噬相关蛋白和生存的关联;利用STRING数据库(10.5版)和Gene MANIA数据库分析线粒体自噬相关蛋白间的相互作用;利用Linked Omics数据库分析线粒体自噬相关基因间的相关性。结果 SFN上调了2 091个蛋白,下调了1 032个蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。电镜观察显示SFN处理导致自噬体堆积。SFN处理后,线粒体内LC3Ⅱ上调,而细胞质中LC3Ⅱ/Ⅰ没有改变。抑制素(prohibitin,PHB)和抑制素2(prohibitin 2,PHB2)在非小细胞肺癌中高表达;高表达PHB2蛋白的患者生存期短;在肺腺癌和肺鳞癌组织中PHB及PHB2均与α-tubulin表达呈正相关;PHB2和LC3Ⅱ表达有关联性(P<0.05)。结论 SFN通过调节线粒体自噬相关蛋白的表达,抑制线粒体自噬。