氧化低密度脂蛋白通过氧化应激介导的MKKs/p38信号通路诱导巨噬细胞炎症反应

摘要

目的探讨MKKs/p38信号通路在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人巨噬细胞炎症反应中的作用。方法分别以浓度为25,50,100μg/ml的ox-LDL刺激人THP-1巨噬细胞,并设立正常对照组。以p38 MAPK特异性抑制剂SB203580对人THP-1巨噬细胞内p38 MAPK进行抑制;分别用MKK3-siRNA及MKK6-siRNA使人巨噬细胞内MKK3及MKK6沉默,DCFH-DA免疫荧光测定细胞内活性氧簇(ROS)生成水平,总抗氧化力(TAC)评估细胞内抗氧化能力;ELISA法检测细胞培养上清液中白介素-18(IL-18)及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法测定细胞内MKK3、MKK6以及p38 MAPK磷酸化水平,IL-18及TNF-α表达水平。结果与正常对照相比,ox-LDL刺激THP-1细胞内ROS生成水平显著升高,TAC水平显著降低(P0.05)。结论ox-LDL可增加巨噬细胞内ROS的产生,激活MKKs/p38 MAPK信号通路,进而诱发炎症反应。