Notch信号通路通过ATF5调控脊髓神经干祖细胞分化

摘要

目的 探讨Notch信号通路在调控成年小鼠脊髓来源神经干祖细胞(spNSPCs)分化中的作用及其机制. 方法 分离和原代培养成年小鼠spNSPCs,将spNSPCs分为对照组和DAPT组,贴壁培养spNSPCs并采用定向培养基进行分化,用神经元和星形胶质细胞的标志物对两组spNSPCs进行免疫荧光染色,并统计神经元和星形胶质细胞分化比例.用免疫细胞荧光染色观察Notch1和转录激活因子5(ATF5)共表达的情况,免疫印迹和实时定量PCR法分析ATF5蛋白和mRNA表达情况.结果 成功分离成年小鼠spNSPCs,其表达神经干细胞标志物Nestin,并且具有向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的潜能.与对照组对比,DAPT组神经元标志物Tuj1的阳性比例从8.6％上升到23.3％ (P＜0.05),而星形胶质细胞标志物GFAP的阳性比例从65.7％下降到42.1％ (P＜0.05).Notch受体与ATF5共表达,DAPT组Notch1胞内段的表达较对照组下降了26％ (P＜0.05),ATF5蛋白水平上升了60％ (P＜0.05),mRNA水平上升了108％ (P＜0.05). 结论 Notch信号通路可能通过ATF5调控脊髓神经干祖细胞分化.