氟化钠通过氧化应激和内质网应激途径诱导PC12细胞凋亡

摘要

目的 探讨氟化钠对PC12细胞凋亡的影响及机制。方法 采用0,0.5,1,2,4 mmol/L浓度梯度的氟化钠培养基分别培养PC12细胞6,12,24,48 h。通过CCK-8法检测细胞活力,筛选构建氟中毒PC12细胞模型所需采用的氟化钠浓度和作用时间。将0,2,4 mmol/L氟化钠溶液培养24 h的PC12细胞进行AnnexinⅤ-FIFC/PI双染流式细胞术验证细胞凋亡状况;生化方法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)的表达水平;RT-PCR及Western blot检测内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)的mRNA及蛋白表达水平。结果 0,2,4 mmol/L氟化钠分别作用PC12细胞24 h,细胞活力与氟化钠成剂量依赖性降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。显微镜下观察细胞形态和流式细胞术验证了细胞凋亡率与氟化钠浓度呈剂量依赖性增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与0 mmol/L氟化钠相比,2,4 mmol/L氟化钠作用下细胞内SOD水平降低,而MDA的水平增加(均P<0.01);GRP78的mRNA及蛋白表达水平增加(P<0.05)。结论 氟化钠可通过细胞氧化应激及内质网应激介导细胞凋亡通路,诱导PC12细胞凋亡。