油酰乙醇胺对大鼠原代血管平滑肌细胞泡沫化病变的治疗作用

摘要

目的 探讨动脉粥样硬化的脂质代谢过程中,油酰乙醇胺(oleoyl ethanolamine,OEA)作为重要参与者的作用及其可能的分子机制。方法 通过氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导大鼠原代血管平滑肌细胞泡沫化病变。将大鼠原代血管平滑肌细胞分为正常组(正常培养)、模型组(100μg/ml的ox-LDL刺激48 h)和OEA组(100μg/ml的ox-LDL与50μmol/L OEA刺激48 h),使用实时荧光定量PCR检测细胞泡沫化密切相关的受体与酶的mRNA表达水平,包括过氧化物酶体增殖物激活受体-α(peroxisome proliferator-activated receptor-α,PPAR-α)、B类清道夫受体白细胞分化抗原36(cluster of differentiation 36,CD36)、B族Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor class B typeⅠ,SR-BⅠ)、胆固醇酰基转移酶A(acyl-coenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)、胆固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)和肉毒碱棕榈酰转移酶-1(carnitine palmitoyl transferase-1,CPT-1)。使用化学酶促法检测各组实验细胞中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量,并计算细胞内胆固醇酯(cholesteryl ester,CE)。采用油红O染色法在显微镜下直观观察各组实验细胞内脂质堆积的情况。结果 与正常组相比,模型组ACAT-1、CD36和SREBP-1c表达升高(P<0.001),SR-BⅠ、CPT-1表达降低(P<0.001),脂代谢基因PPAR-α表达降低(P<0.05);细胞内TC、TG含量和CE/TC显著升高(P<0.001),细胞内脂滴明显增加。与模型组相比,OEA组ACAT-1、CD36和SREBP-1c表达降低(P<0.05),SR-BⅠ、CPT-1表达升高(P<0.001),脂代谢基因PPAR-α表达升高(P<0.01);细胞内TC、TG含量和CE/TC降低(P<0.001),并且可从显微镜直观观察到细胞内脂质堆积程度降低。结论 OEA上调脂代谢基因PPAR-α表达,可以改善细胞内脂质堆积情况,这一效果可能是通过PPAR-α通路调控CD36、ACAT-1、SREBP-1c、SR-BⅠ、CPT-1等重要脂质代谢基因实现的。