大鼠和小鼠阴道组织神经血管层的全层铺片技术探索

摘要

目的通过不同实验条件建立一种稳定、可重复的用于显示阴道神经与血管的全层铺片技术。方法雌性SD大鼠和ICR小鼠各20只,麻醉后分离出阴道组织,分别用中性缓冲福尔马林和丙酮固定,每种固定液分别固定24 h和48 h后,在显微镜下逐层剥离出阴道肌层制作铺片,观察不同固定方式制作铺片的脱片率,并行HE染色、Masson染色、嗜银染色和免疫组化观察组织的形态、肌纤维、血管和神经组织。结果同种固定液固定24 h和48 h在制作铺片的难易程度上无明显差别。不同的固定液和不同的固定时间在是否容易脱片方面无显著差异(Fisher确切概率法,P_(小鼠)=0.893和P_(大鼠)=0.429)。中性缓冲福尔马林固定后组织较韧,更易剥离各层组织,而丙酮固定的组织易碎,组织不完整。不同的固定方法对HE染色、Masson染色和嗜银染色结果影响不大,但对免疫组化染色会产生较大影响,即中性缓冲福尔马林固定使抗体更容易结合。结论两种固定液都能很好地对阴道组织起固定作用,中性缓冲福尔马林固定液用于制作阴道肌层全层铺片优于丙酮,该铺片技术能很好地显示阴道组织中的肌肉、神经与血管组织,可用于今后的研究。