固相萃取-高效液相色谱手性流动相添加剂法测定血浆中氧氟沙星对映体

摘要

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法(high performance liquid chromatogoraphy,HPLC)拆分及测定血浆中氧氟沙星对映体的方法.方法:以L-异亮氨酸为配合剂,Cu2+为配合离子,采用HPLC手性流动相添加剂法测定血中氧氟沙星对映体的含量.色谱柱为ODS-BP柱(250 mm×4.6 mm,5μm),内标物为环丙沙星,流动相为手性添加剂溶液(含1.31 g/L L-异亮氨酸和0.80 g/L CuSO4)-甲醇(81.5∶18.5),激发波长为330 nm,发射波长为504 nm,流速为0.8 mL/min.其中,应用C18固相萃取小柱萃取血浆中的氧氟沙星.结果:在经过优选的色谱条件下,对映体可以良好分离,分离度达到1.5以上;S-(-)-与R-(+)-氧氟沙星的线性范围均为0.08～20 μg/mL(r分别为0.994 5和0.994 7),最小检测限均为4 ng/mL,平均萃取回收率分别为89.77％和88.07％,平均回收率分别为97.19％和98.39％,日内RSD分别为2.9％和3.0％,日间RSD为2.0％和2.2％.结论:该法血样处理简单,干扰小,灵敏度高,精密度好,可以作为对血浆中左、右旋氧氟沙星分别测定的方法.