CCL20对CBA/J小鼠CCR6^+调节性T细胞及妊娠结局的影响

摘要

目的研究CCL20对CBA/J小鼠CCR6^+调节性T细胞(Treg细胞)及妊娠结局的影响。方法将CBA/J(♀)×DBA/2(♂)作为自然流产小鼠模型(自然流产组),CBA/J(♀)×Balb/c(♂)作为正常妊娠小鼠模型(正常妊娠组)。于CBA/J小鼠不同的妊娠时期,观察妊娠结局,采用RT-PCR、Western blotting、ELISA、流式细胞技术检测CCL20及CCR6^+Treg细胞的动态变化。给予正常妊娠小鼠CCL20中和抗体,自然流产小鼠重组CCL20,观察妊娠结局的变化。体外观察CCL20及其抗体对Treg细胞的趋化、增殖、细胞因子水平的变化。结果妊娠14.5 d(gd 14.5),自然流产组和正常妊娠组的胚胎吸收率分别为11.25%和2.54%,两者之间差异有统计学意义(P=0.001 8)。不同妊娠时期,自然流产组小鼠外周血及子宫中CCL20及CCR6的表达均低于正常妊娠组。在妊娠早期尤其是gd 2.5时,正常妊娠组小鼠CCL20和CCR6表达水平及Treg细胞比例均明显上升,而在自然流产组小鼠中并未出现明显的上升。在gd 0.5给予正常妊娠小鼠CCL20中和抗体后,小鼠的胚胎吸收率显著增加,而CCR6^+Treg的比例明显下降。给予自然流产小鼠重组CCL20后,小鼠的胚胎吸收率下降,而CCR6^+Treg的比例上升。CCL20能够促进Treg细胞的趋化功能、增殖功能以及其抑制性细胞因子的分泌功能,从而导致T细胞之间的平衡向Th2及Treg细胞倾斜,有利于妊娠的维系。结论 CBA/J(♀)×DBA/2(♂)小鼠的自然流产可能与CCL20及CCR6^+Treg的下调有关,尤其在孕早期。早期干预CCL20的蛋白水平能够改变CCR6^+Treg细胞的数量及功能,影响妊娠结局。