百合炭疽病病原菌PCR检测技术

摘要

百合炭疽病是百合(Lilium longiflorum)种球上重要病害之一,其病原为百合炭疽病菌(Colletotrichum lilii Plakidas)。通过百合炭疽病菌与常见胶孢炭疽病菌(C.gloeosporioides)等4种不同炭疽病菌种类的核糖体DNA ITS序列比对设计特异性引物,通过特异性检验,确定BT73/BT-R510和BT-F98/BT-R510。2对引物均可以分别扩增出438bp和413bp的百合炭疽病菌目标片段,而对常见4种炭疽病菌及百合球茎上2种常见的病原菌百合枯萎病菌及灰霉病菌均不能扩增出相同的目标片段。用引物对F73/BT-R510和BT-F98/BT-R510特异性PCR扩增百合炭疽病菌的灵敏度分别都在50pg以上。用外圈引物对F73/BT-R510和内圈引物对BT-F98/BT-R510进行巢式PCR扩增,对百合炭疽病检测的灵敏度提高不明显。