人白细胞介素-16真核表达载体的构建及其对Th2型肿瘤细胞的促逆转作用

摘要

目的 :构建人IL 16真核表达载体 ,分析其对Th2型肿瘤细胞的逆转作用。方法 :用RT PCR技术从人外周血单个核细胞中获取IL 16cDNA ,插入PUC 18T载体并测序 ,构建并鉴定真核表达载体PcDNA3 IL 16 ,转染KarpasT淋巴瘤细胞 ,分析阳性克隆中IFNγ ,IL 2 ,IL 4 ,IL 6 ,IL 13,TNFα和IL 16等细胞因子的表达状况。结果 :序列测定显示所克隆的人IL 16cDNA与基因库中所登录的序列完全一致 ,EcoRI和BamHI双酶切及PCR鉴定显示所构建的真核表达载体PcDNA3 IL 16完全正确 ,RT PCR显示转染PcDNA3 IL 16的KarpasT淋巴瘤细胞高表达IL 16mRNA ,同时 ,Th1类细胞因子IFNγ表达明显增高 ,Th2类细胞因子IL 4 ,IL 6 ,IL 13表达降低 ,MTT法显示KarpasT淋巴瘤细胞的增殖受到明显抑制。结论 :成功构建了真核表达载体PcDNA3 IL 16 ,转染KarpasT淋巴瘤细胞后使其细胞因子类型由Th2型向Th0型逆转 ,且生长受到明显抑制 ,表明向肿瘤细胞转染人IL 16是一种有用的肿瘤生物治疗方法。