NOK/STYK1单克隆抗体的制备及应用

摘要

根据NOK/STYK1(Novel Oncogene with Kinase Domain或Serine/Threonine and Tyrosine Receptor Protein Kinase)的结构特点设计并合成抗原,免疫Balb/C小鼠后,取免疫反应最好的小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合.应用有限稀释法筛选得到能稳定分泌抗NOK/STYK1的单克隆杂交瘤细胞株7G9.该细胞株经过扩大培养后,通过小鼠腹水制备纯化出NOK/STYK1的单克隆抗体.Western blotting和ELISA检测结果显示,纯化出的单克隆抗体能够特异性识别NOK/STYK1,且效价较高.通过免疫荧光标记和免疫组化分析显示,该单克隆抗体能够有效检测多种肿瘤细胞内及恶性肿瘤组织样本中高表达的NOK/STYK1.