鸡γ-干扰素基因在大肠杆菌中的表达

摘要

构建鸡γ-干扰素基因(lFN-γ)的融合表达质粒,并在原核系统表达.根据GenBank发表的鸡γ-干扰素核苷酸序列,使用primer5设计一对特异性引物,通过RT-PCR技术从ConA诱导培养的鸡脾脏淋巴细胞中克隆出鸡γ-干扰素基因并对其进行测序.测序结果表明,鸡γ-干扰素基因全长495bp,具有一个完整的开放阅读框,编码164个氨基酸,与国外发表的序列同源性为100%.将序列连接到原核表达载体pET28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳分析.结果表明鸡γ-干扰素表达蛋白大小为20.8KD,并以包涵体形式表达.为鸡γ-干扰素生物制剂或疫苗佐剂的开发奠定基础.