真姬菇热激蛋白70(HmHSP70)的纯化

摘要

SDS-PAGE电泳分析显示,经过不同浓度梯度的IPTG诱导,获得了带有重组质粒pET32a-c(+)/HmHSP70的大肠杆菌产生可溶性重组蛋白的最佳诱导条件.当IPTG的终浓度为0.15 mmol/L时,诱导可溶性重组蛋白的量最高,重组蛋白浓度为22.5mg/ml.同时SDS-PAGE显示得到蛋白分子量约为90KDa的融合蛋白.并对诱导过程中产生的包涵体进行了变性和透析复性,使其变为可溶性蛋白;通过镍亲和层析的纯化以及肠激酶的酶切作用,最终得到纯度较高的HmHSP70,纯化后的目的蛋白分子质量约为70KDa,与预期结果吻合.