RRS1对乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭转移的影响及其作用机制

摘要

目的探讨核糖体合成调节因子1(RRS1)基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭转移的影响及其作用机制。方法体外培养乳腺癌MDA-MB-231细胞、BT549细胞、人正常乳腺上皮HMEC细胞,采用Western blot方法检测以上细胞中RRS1蛋白的相对表达情况。乳腺癌MDA-MB-231细胞分别转染慢病毒shRNA-Ctrl、shRNA-RRS1、空载质粒及RRS1过表达质粒后,细胞分为空白处理组(A组),转染shRNA-Ctrl组(B组),转染shRNA-RRS1组(C组),转染Vector组(D组),转染Vector-RRS1组(E组),转染48 h后,采用Western blot方法检测5组细胞中RRS1蛋白相对表达情况,采用划痕实验、Transwell实验检测RRS1基因对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力影响;采用Western blot方法检测MDA-MB-231细胞E钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)、糖原合成激酶3(GSK3β)、锌指转录因子(Snail)蛋白的相对表达情况。结果Western blot方法检测结果显示,乳腺癌MDA-MB-231、BT549细胞中的RRS1蛋白相对表达量明显高于正常乳腺上皮HMEC细胞(F=74.71,P<0.01)。Western blot方法检测结果显示,C组细胞中RRS1蛋白相对表达量明显低于A、B组,E组细胞中RRS1蛋白的相对表达量明显高于A、B、C、D组(F=33.26,P<0.01)。Transwell小室和划痕实验结果显示,与A、B组相比,C组细胞的侵袭和迁移能力降低,与A、D组相比,E组细胞侵袭和迁移能力升高(F=208.30、187.70,P<0.01)。Western blot检测结果显示,与A、B组相比,C组细胞中Vimentin、P-AKT、GSK3β、Snail蛋白相对表达量低,与A、D组相比,E组细胞中Vimentin、P-AKT、GSK3β、Snail蛋白相对表达量高(F=34.29~69.03,P<0.01),与A、B组相比,C组细胞中E-cadherin蛋白相对表达量高,与A、D组相比,E组细胞中E-cadherin蛋白相对表达量低(F=36.00,P<0.01)。结论RRS1可能参与了乳腺癌的侵袭和转移过程,且其作用可能与促进细胞上皮-间质转化有关。