介绍一种简易的成纤维细胞培养方法

摘要

@@ 在研究人体细胞生物学、体细胞遗传学和疾病诊断方面,成纤维细胞培养日渐成为一种不可缺少的手段.目前,有关成纤维细胞的培养方法不尽相同.笔者经多次实验总结出一种相对简易的成纤维细胞培养方法,供同道们参考.rn1 材料和方法rn手术切取成年健康兔全层皮肤0.5cm2～1.0cm2,置盛有含10%～15%小牛血清RPMI1640(Sigma USA)营养液的容器内,在净化工作台下用眼科剪和镊将皮下脂肪组织去除干净,以PBS或Hank's液反复冲洗三次(末次可用RPMI1640液),将其剪成0.5mm3～1mm3的小块,以每块1cm的间距接种在1～2个玻璃或塑料培养瓶中,然后将其翻转倒置(接种面在上)加入适量营养液,在5%CO2孵箱中静置培养3～4h后,再轻轻翻转培养瓶(接种面在下),使组织与营养液充分接触,再置培养箱内继续培养.3d后更换营养液(保留原液体量的1/3),倒置相差显微镜下定期观察细胞的动态变化,及时更换营养液并适时传代.