牙龈卟啉单胞菌感染内皮细胞导致白介素-8表达升高的胞内机制初探

摘要

目的:探讨在牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)感染血管内皮细胞过程中引起白细胞介素(interleukin,IL)-8表达升高的胞内机制。方法:厌氧培养Pg,原代培养人脐静脉血管内皮细胞,用RNA干扰技术分别制作核苷酸结合寡聚化结构域样受体1(nucleotide binding oligomerization domain-containing protein 1,NOD1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体2(NOD-containing protein 2,NOD2)基因沉默的内皮细胞模型,用Pg感染正常的和基因沉默的内皮细胞,ELISA法检测细胞培养上清液中的IL-8水平,RT-PCR检测IL-8、NOD1、NOD2的mRNA和蛋白表达水平,Western blot法检测NOD1、NOD2的蛋白表达水平。用NOD1和NOD2的激动剂DAP和MDP分别激活内皮细胞,并检测IL-8、NOD1、NOD2的mRNA和蛋白表达水平。结果:正常人脐静脉血管内皮细胞受Pg感染后IL-8的mRNA和蛋白表达高于未感染的细胞,NOD1、NOD2表达亦均上调;NOD1、NOD2基因分别沉默的内皮细胞模型在受Pg感染后,其IL-8表达的mRNA和蛋白水平明显低于Pg感染的正常内皮细胞(P<0.01);NOD1和NOD2激动剂(DAP/MDP)激活内皮细胞后,IL-8表达的mRNA和蛋白表达水平均上调(P<0.05)。结论:Pg可诱导正常人脐静脉内皮细胞IL-8表达上调,NOD1和NOD2作为胞内模式识别受体在其中发挥重要作用。