23F型肺炎球菌多糖与CRM197蛋白结合物制备及特性研究

摘要

目的 采用改良胺化还原法,白喉无毒突变体CRM197蛋白作为载体,制备23F型肺炎球菌多糖蛋白结合物.方法 在还原胺法的基础上,以1,6-己二酰肼(ADH)为分子臂,在碳二亚胺(EDAC)作用下衍化CRM197蛋白,衍化后蛋白再与多糖上的醛基反应,形成共轭结合；采用高效液相色谱技术(HPLC)、免疫扩散等方法分析结合物,并将获得的结合物免疫NIH小鼠,用ELISA方法检测多糖IgG水平.结果 HPLC图谱和免疫扩散检测结果证明了结合物的获得；动物免疫产生了较多糖高的抗23F肺炎多糖抗体,并有免疫记忆发生.结论 采用改良还原氨化法可以制备出动物免疫原性良好的23F型多糖蛋白结合物.