黄颡鱼仔鱼卵黄蛋白ELISA检测方法研究

摘要

【目的】建立黄颡鱼仔鱼(Pelteboagrus fulvidraco)卵黄蛋白的ELISA检测方法,探讨黄颡鱼仔鱼体内卵黄蛋白含量的发生规律及仔鱼投喂生物饵料的最佳时间,为研究黄颡鱼仔鱼早期营养和开口饵料提供依据。【方法】以黄颡鱼仔鱼为试验材料,卵黄蛋白抗血清为抗体,纯化的卵黄蛋白为抗原,建立间接竞争酶联免疫吸附反应(ELISA)检测方法,测定黄颡鱼仔鱼卵黄蛋白在不同发育时期(破膜43,48,57,65,72,81,89,96,105,113,120和129h)的变化情况。【结果】黄颡鱼仔鱼卵黄蛋白ELISA检测中,抗血清的最佳稀释倍数为1∶20 000倍,包被抗原的最佳质量浓度为125ng/mL,最适检测质量浓度为20～2 000ng/mL,批内变异系数为6.529%,批间变异系数为6.873%。利用建立的ELISA方法检测发现,黄颡鱼卵黄蛋白含量随发育时间的延长而逐渐递减,至96h时缓慢下降直至消失。【结论】利用ELISA方法能相对准确地检测黄颡鱼仔鱼卵黄蛋白含量的变化,破膜96h是黄颡鱼仔鱼由内源营养阶段转向外源营养阶段的转折点,此时开始投喂适口的生物饵料更有利于黄颡鱼仔鱼开口摄食及生长发育。