小鼠OSTβ的K70Q突变对OSTα-OSTβ膜转位的影响

摘要

①目的探讨小鼠有机溶质转运体β亚单位（organic solute transporter beta,OSTβ）的点突变OSTβ（K70Q）对OSTα-OSTβ膜定位的影响。②方法提取小鼠回肠RNA,克隆OSTα和OSTβ的编码序列,测序检测OSTβ（K70Q）突变体,进而构建OSTα、OSTβ和OSTβ（K70Q）的双分子荧光互补BiFC表达载体及绿色荧光蛋白GFP融合蛋白,转染HEK-293细胞,于共聚焦显微镜下观察OSTβ（K70Q）对OSTα与OSTβ的相互作用和膜定位的影响。③结果突变不影响OSTα和OSTβ（K70Q）的相互作用,但阻碍了OSTα-OSTβ（K70Q）复合体的膜转位,并且可通过显性负效应干扰正常OSTα-OSTβ复合体的膜转位。④结论发现了1个小鼠OSTβ的点突变OSTβ（K70Q）,突变不影响OSTα和OSTβ（K70Q）的相互作用,但阻碍了OSTα-OSTβ（K70Q）复合体的膜转位,并且可通过显性负效应干扰正常OSTα-OSTβ复合体的膜转位。