SARS冠状病毒核蛋白与mGM-CSF融合质粒的构建及表达

摘要

目的构建SARS冠状病毒 (SARS-COV)核蛋白(N)与mGM-CSF的融合真核表达质粒,借助mGM-CSF的免疫佐剂作用,提高SARS DNA疫苗的免疫效果.方法采用PCR方法扩增N和mGM-CSF基因片段, 用分子克隆和基因融合的方法将目的片段定向插入真核表达载体中,构建融合表达质粒pVAX 1/N-mGM-CSF, 并以融合质粒转染细胞,用免疫细胞化学和Western Blot的方法鉴定融合质粒在体外的表达.结果经酶切鉴定及DNA序列测定证实融合质粒构建正确,细胞转染实验表明,融合质粒能在COS-7细胞中表达.结论成功构建SARS-COV核蛋白与mGM-CSF的融合表达质粒,重组质粒能在真核细胞内表达.