用酵母双杂交筛选与AP-2α相互作用的因子

摘要

AP 2α是重要的转录因子家族AP 2的成员之一.为了研究AP 2α在体内的转录调控方式及与其直接相互作用的蛋白因子,用AP 2α作为饵蛋白通过酵母双杂交系统筛选HeLa细胞的cDNA文库.筛选得到的一个阳性克隆中,经鉴定含有人TESTIN基因cDNA片段自5876bp起始的完整3′端序列.将此TESTIN片段引入GST基因融合系统成功的进行了表达.得到大小约45kD的GST TESTIN融合蛋白,用于多克隆抗体的制备.用Western blot检测TES TIN和AP 2α在HeLa细胞中的表达和定位.结果表明:TESTIN的表达主要在细胞质中,细胞核内也有少量表达;而AP 2α表达主要集中于细胞核内.它们的相互作用可能与AP 2α在细胞内分布及其调控基因转录的方式有关.