RACK1和EGFR在非小细胞肺癌组织中的表达及相关性研究

摘要

目的:探讨活化的蛋白激酶受体1(receptor for activated C-kinase 1,RACK1)和表皮生长因子受体(epider-mal growth factor receptor,EGFR)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及相关性,并初步探究其分子机制.方法:采用免疫组化EnVision法检测RACK1及EGFR蛋白在120例NSCLC和40例癌旁组织中的表达,分析其相关性及与患者临床病理学特征的关系.培养人NSCLC细胞系A549,分别构建与筛选靶向RACK1和EGFR的siRNA(RACK1 siRNA和EGFR siRNA)及非靶序列siRNA对照组.转染A549细胞后,采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western Blot检测A549细胞中RACK1、EGFR的表达情况;细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活力;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡.结果:(1)RACK1和EGFR蛋白在NSCLC组织中的阳性率分别为58.3％和63.3％,显著高于癌旁组织阳性率2.5％和5.0％(P<0.05).(2)RACK1和EGFR蛋白在肺腺癌中的阳性率分别为88.0％和77.3％显著高于鳞癌和其他类型(P<0.05).(3)在肺腺癌组织中,RACK1蛋白的表达与吸烟情况、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05),EGFR蛋白的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05).(4)肺腺癌组织中RACK1与EGFR表达呈正相关(r=0.290,P=0.012).(5)在A549细胞中下调EGFR可减少RACK1蛋白表达,抑制细胞活力,进而诱导细胞凋亡.结论:RACK1、EGFR协同促进了肺腺癌的发生、发展过程,其分子机制可能与EGFR-PKC-RACK1-ERK1/2通路有关.