Cyclin D3、CDK11p58在脂多糖诱导大鼠星形胶质细胞活化过程中的表达及相互作用

摘要

目的:探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导星形胶质细胞活化过程中细胞周期蛋白D3(cyclin D3)、周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)11p58 的表达、亚细胞定位及相互作用.方法:LPS 刺激体外培养大鼠星形胶质细胞,采用Western Blot 技术检测过程中cyclin D3 及CDK11p58 蛋白的表达情况;用免疫共沉淀技术分析LPS刺激前后cyclin D3 及CDK11p58 形成复合物的情况;用免疫荧光双标技术检测二者的亚细胞定位情况;将cyclin D3 真核表达载体转染入星形胶质细胞,用核浆分离技术分析过表达cyclin D3 对于CDK11p58 亚细胞定位影响.结果:LPS 呈浓度依赖性上调星形胶质细胞内cyclin D3 及CDK11p58 蛋白表达;cyclin D3 与CDK11p58 可形成复合物,LPS 刺激增强二者相互作用;静息状态下星形胶质细胞内cyclin D3 及CDK11p58 均主要位于细胞核,但在细胞质内亦有不同程度表达,LPS 刺激后二者均向细胞核聚集,且出现明显细胞核内共定位; 过表达cyclin D3 可促进CDK11p58 向细胞核转运.结论:LPS 可刺激大鼠星形胶质细胞内cyclin D3 及CDK11p58 蛋白表达;cyclin D3 通过与CDK11p58 相互作用,促进CDK11p58 细胞核转运,从而参与星形胶质细胞活化过程.