CYP1B1抑制剂在心力衰竭细胞模型中缓解铁死亡的机制研究

摘要

目的:探讨细胞色素P4501B1(cytochrome P4501B1,CYP1B1)及其抑制剂对小鼠心肌细胞铁死亡的影响及其潜在的分子机制。方法:首先,对正常和心力衰竭小鼠行RNA测序检测差异表达的基因,使用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测比较去氧肾上腺素(phenylephrine,PE)刺激组和正常组原代心肌细胞中CYP1B1的表达情况,通过丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、Fe2+测定分析两组铁死亡指标;然后,使用不同浓度的CYP1B1抑制剂α-萘黄酮预处理心肌细胞后再行PE刺激,与对照组、PE组比较铁死亡指标,并行qPCR检测比较各组心力衰竭标志物的基因表达水平;最后,通过Western Blot和免疫荧光测定铁死亡相关蛋白核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的表达。结果:PE刺激增加了原代心肌细胞的CYP1B1表达水平和铁死亡指标,而CYP1B1抑制剂α-萘黄酮能逆转这种改变,并回调了Nrf2的表达,缓解了心力衰竭基因标志物的上调。结论:CYP1B1抑制剂在心力衰竭的细胞模型中缓解了心肌细胞铁死亡,这种保护作用可能通过Nrf2实现,提示CYP1B1可能作为心力衰竭的潜在治疗靶标之一。