粟酒裂殖酵母质膜ATP酶的制备及活性测定

摘要

用小玻璃珠破碎处于对数生长中期的粟酒裂殖酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ）细胞，将所得到的匀浆液经差速离心，酸处理，不连续蔗糖密度梯度离心，得到质膜ＡＴＰ酶，并对其进行鉴定及活性测定．发现所制备的质膜ＡＴＰ酶对ＮａＮ３不敏感，而对Ｎａ３ＶＯ４具有高度的敏感性，半抑制浓度为１２μｍｏｌ／Ｌ，表明所制备的质膜ＡＴＰ酶较纯，不混杂线粒体ＡＴＰ酶．该酶的最适ｐＨ为６．３，对Ｍｇ２＋有很强的依赖性，对ＡＴＰ有较强的亲和性，Ｋｍ值为１．３ｍｍｏｌ／Ｌ．