次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型杂交瘤细胞的快速筛选方法

摘要

目的　建立一种快速而简便的次黄嘌呤 -氨基喋呤 -胸腺嘧啶 (HAT)敏感型杂交瘤细胞株的筛选方法 ,以缩短二次杂交瘤细胞制备时间。方法　在培养瓶中培养杂交瘤细胞 ,每 2～ 3天倍比提高培养液中 8-氮鸟嘌呤 (8- N)浓度 ,从 1.2 5μg/ ml直至 2 0 μg/ ml,并用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)比较筛选前后抗体吸光度 (A)值。结果　成功地诱导筛选后 ,获得HAT敏感的次黄嘌呤 -鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (HGPRT)缺陷型杂交瘤细胞 2株 ,均保留分泌单抗功能 ,其单抗 A值与 8- N筛选培养前无明显差异。结论　改进后的筛选方法较常规方法所需时间缩短 1.0～ 2 .