肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸致乳腺癌细胞迁移中的作用

摘要

目的:研究肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸(LPA)致乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架重构及细胞迁移中的作用。方法:10μmol/LLPA孵育MDA-MB-231细胞4h,用Transwell法检测细胞迁移速度;用Western blot及免疫印迹技术检测细胞内骨架组分及胞浆组分中肌动蛋白的分布改变;用二维电泳法分离并比较细胞内骨架组分及胞浆组分中磷酸化和非磷酸化的肌动蛋白含量。结果:10μmol/L浓度的LPA可明显增加MDA-MB-231细胞迁移速度。LPA处理后细胞内F-肌动蛋白含量明显增加,而肌动蛋白总量并未出现明显变化。此外,LPA处理还可明显升高细胞内胞浆组分中磷酸化的肌动蛋白量;在骨架组分中,肌动蛋白仅以磷酸化的形式存在,且含量在LPA刺激前后无明显差异。结论:LPA可促进乳腺癌细胞的迁移能力及细胞骨架发生聚合,其作用可能与其改变细胞胞浆中肌动蛋白的磷酸化水平有关。