人胰腺癌细胞中对5-氟尿嘧啶耐药相关基因的检测分析

摘要

目的:利用基因芯片技术,对体外筛选获得的耐不同浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)的胰腺癌细胞株基因表型进行对比,找出不同耐药表型细胞株的基因表达改变情况,以此发现一些与胰腺癌细胞5-FU耐药相关的重要基因或通路。方法:用不断增加浓度的5-FU反复刺激细胞,直到细胞能完全耐受不同浓度5-FU,获得耐不同浓度5-FU的MIAPaCa-2细胞株。由基因芯片筛选出明显改变的基因后再用实时定量PCR方法验证。结果:本研究成功地获得两种对5-FU耐药的胰腺癌细胞株,低耐药表型MIA-FU-2.4和高耐药表型MIA-FU-10.0。基因分析结果提示耐药可能与广泛的基因表达改变相关。在MIA-FU-2.4和MIA-FU-10.0两种表型中分别有1075及1628个基因出现了表达改变,涉及细胞周期、细胞黏附、信号转导、DNA修复和凋亡等多种生物学功能。结论:胰腺癌MIAPaCa-2细胞株5-FU耐药的发生涉及多种细胞生物学功能改变,特别与凋亡、DNA修复、细胞周期等基因和一些信号转导途径相关。