肾癌细胞系中HOTAIR表达的测定及稳定高表达HOTAIR肾癌细胞株的建立

摘要

目的:检测常用肾癌细胞系中HOTAIR的表达情况及建立稳定高表达HOTAIR肾癌细胞株.方法:①q-PCR检测正常肾细胞系(HK-2)和4种肾癌细胞系(os-rc-2,kevt-3,achn和769-p)中HOTAIR的表达;②利用携带HOTAIR基因的慢病毒(pLenti GFP Puro-HOTAIR)感染肾癌细胞系(769-p)后,并采用嘌呤霉素(Puro)抗性筛选方法建立高表达HOTAIR肾癌细胞株.结果:①5种细胞系HOTAIR表达的高低依次是kevt-3、os-rc-2、achn、769-p、HK-2;②慢病毒(pLenti GFP Puro-HOTAIR)转染肾癌细胞系(769-p)后,HOTAIR表达明显升高.结论:①高侵袭性肾癌细胞株(kevt-3、os-rc-2)中HOTAIR的表达明显高于低侵袭性肾癌细胞株(achn、769-p)及正常肾细胞株(HK-2);②成功建立稳定表达的HOTAIR的769-p-HOTAIR细胞系.