长链非编码RNA ENSMUST00000127391对小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响

摘要

目的:探究长链非编码RNA ENSMUST00000127391(lncRNA 127391)在高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞(mice mesangial cell,MMC)中的表达及功能。方法:在成功构建重组质粒pCDH-lncRNA 127391的基础上,将重组质粒pCDH-lncRNA127391和对照质粒p CDH分别转染MMC细胞,通过RT-qPCR法检测lncRNA 127391表达水平。蛋白质免疫印迹法检测增殖和纤维化相关蛋白水平;CCK8法检测lncRNA 127391对MMC细胞增殖的影响;流式细胞术检测对细胞凋亡的影响。结果:过表达lncRNA 127391的MMC细胞构建成功。CCK8结果显示,lncRNA 127391表达增加后,MMC细胞增殖速度减慢;蛋白质免疫印迹结果表明过表达lncRNA 127391后,MMC细胞中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、纤维连接蛋白(FN)和Ⅰ型胶原(Col-1)蛋白表达水平均下降;流式分析结果显示,过表达lncRNA127391后,MMC细胞凋亡数增加。两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:lncRNA 127391可以抑制高糖培养的MMC细胞增殖和纤维化。